酰胺化和乙酰化
- 如果合成多肽為蛋白質(zhì)的內(nèi)部序列,通過(guò)N端乙酰化或C端酰胺化可以去除多肽電荷使其更趨向于蛋白質(zhì)的自然結(jié)構(gòu),同時(shí)增強(qiáng)了多肽對(duì)肽鏈內(nèi)切酶的抵抗力。
生物素及FITC標(biāo)記
- 針對(duì)羧基端生物素標(biāo)記的多肽,需要在其羧基端添加賴(lài)氨酸,然后將生物素連接在賴(lài)氨酸的側(cè)鏈上,這樣就消除了賴(lài)氨酸的正電荷。
- FITC是熒光標(biāo)記的活性前體。為了有效的標(biāo)記N端,可在多肽的N端和熒光基團(tuán)之間插入七碳的6-氨基己酸(Ahx),其隔結(jié)構(gòu)(NH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-COOH)。
成環(huán)修飾
- 作為多肽最常見(jiàn)的修飾之一,環(huán)化不僅增加了多肽鏈的構(gòu)象穩(wěn)定性,還提升了藥物吸收的藥代動(dòng)性質(zhì)和生物膜透過(guò)性。構(gòu)象穩(wěn)定所帶來(lái)的靶向性增強(qiáng),酶穩(wěn)定性的提高和相對(duì)較大的靶標(biāo)作用面積,都使得環(huán)肽成為藥物開(kāi)發(fā),尤其是胞內(nèi)靶點(diǎn)和口服多肽藥物的理想候選骨架。金斯瑞擁有超過(guò)20種環(huán)肽骨架的合成技術(shù),以及更復(fù)雜的環(huán)肽修飾策略。
二硫鍵修飾
- 在半胱氨酸殘基間形成二硫鍵可以實(shí)現(xiàn)多肽環(huán)化,但由于二硫鍵是隨機(jī)形成的,因此對(duì)于含多個(gè)半胱氨酸殘基的多肽來(lái)說(shuō),這是個(gè)挑戰(zhàn)。金斯瑞可在指定的半胱氨酸間構(gòu)建二硫鍵,我們最多可以在一條多肽定位引入三對(duì)二硫鍵。
多種磷酸化
- 多肽磷酸化可以幫助研究磷酸化對(duì)多肽和蛋白結(jié)構(gòu)的影響以及蛋白激酶的作用機(jī)理,金斯瑞已經(jīng)成功地為客戶(hù)合成了大量的絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸等磷酸化多肽。對(duì)于序列中含有多個(gè)含羥基的氨基酸(S,T,Y),可以通過(guò)正交保護(hù)或使用被Fmoc保護(hù)的磷酸化氨基酸原料來(lái)實(shí)現(xiàn)序列中磷酸化氨基酸的選擇性。
甲基化修飾
- 蛋白質(zhì)的甲基化被認(rèn)為是一種重要的修飾,有助于調(diào)節(jié)細(xì)胞功能,如轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化。翻譯后氮
-甲基化通常發(fā)生在賴(lài)氨酸或精氨酸側(cè)鏈上。甲基化修飾蛋白的多肽可用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究、或X射線晶體學(xué)結(jié)構(gòu)測(cè)定。金斯瑞可以合成含有單個(gè)、二個(gè)、三個(gè)甲基化賴(lài)氨酸的多肽,其純度可達(dá)>98%,并且也可以和其他甲基化修飾組合。
KLH, BSA,OVA
- 多肽抗原由于分子太小而不能產(chǎn)生顯著的免疫反應(yīng),因此需要將多肽抗原偶聯(lián)到BSA、OVA、KLH等較大的蛋白載體上。KLH由于在ELISA或Western
blotting檢測(cè)中沒(méi)有抑制作用,所以不影響檢測(cè)結(jié)果。常用的偶聯(lián)原理是馬來(lái)酰亞胺法,
即將多肽中的半胱氨酸殘基與載體蛋白偶聯(lián)。因此合成抗原多肽時(shí),在其N(xiāo)端或C端添加一個(gè)半胱氨酸殘基有利于多肽與載體蛋白的偶聯(lián)。
聚乙二醇(PEG)修飾
- PEG聚合體具有非離子性的、無(wú)毒性的、無(wú)生物排斥、高親水性的等,PEG修飾通過(guò)化學(xué)方法將PEG聚合物偶聯(lián)到大分子上(抗體、多肽等)。PEG修飾的大分子具有較高的溶解性(主要可用于疏水性藥物)及生物藥效,可通過(guò)偽裝多肽,騙過(guò)宿主細(xì)胞的免疫系統(tǒng),來(lái)增強(qiáng)多肽的治療效果。它也可以通過(guò)降低腎臟清除率來(lái)延長(zhǎng)多肽的代謝時(shí)間。
同位素標(biāo)記
- 為了進(jìn)行核磁共振實(shí)驗(yàn),我們將多肽標(biāo)記穩(wěn)定的非放射性的同位素。標(biāo)記2H、15N、13C或 15N
及 13C同時(shí)標(biāo)記的多肽,合成后可以便于核磁共振檢測(cè)。如果您需要標(biāo)記修飾,請(qǐng)?zhí)峁┠男蛄屑皹?biāo)記需求。
復(fù)合抗原肽修飾
- 多抗原肽(Multiple-Antigen peptide,
MAP)是生產(chǎn)高效價(jià)的抗多肽抗體和多肽疫苗的一種有效方法。多重抗原肽以賴(lài)氨酸的a-或e-基團(tuán)形成主鏈,以多拷貝的肽抗原作外表層的分枝狀合成多肽。根據(jù)賴(lài)氨酸的數(shù)目,可以合成不同數(shù)目側(cè)鏈的多抗原肽,這樣不必將抗原偶聯(lián)到載體蛋白質(zhì)便能產(chǎn)生高滴度、高親和力的抗體。