As serinoproteases s?o enzimas da pe?onha capazes de esgotar o fibrinogênio circulante na presa por meio da quebra dessa molécula. A fibrina formada a partir dessa quebra é frágil e n?o promove a agrega??o plaquetária, tornando o sangue do indivíduo incoagulável. Há alguns anos foi descrita uma serinoprotease isolada a partir de pe?onha de serpente da espécie Bothrops alternatus, denominada de Bhalternina, que apresentou atividade fibrinogenolítica. Enzimas que apresentam esse tipo de atividade, funcionam como agentes anticoagulantes e, por isso, possuem o potencial de serem aplicadas na terapia e preven??o de desordens trombóticas. Sendo assim, através da engenharia genética, o objetivo do trabalho foi realizar clonagem e express?o da enzima Bhalternina da pe?onha de serpente Bothrops alternatus em sistema bacteriano. A sequência codificante desta proteína foi ligada ao vetor pGS-21a, e a rea??o de liga??o foi utilizada na transforma??o de células competentes TOP10 por eletropora??o. Após o cultivo, algumas col?nias foram selecionadas para obten??o do DNA plasmidial e análise do perfil eletroforético. A col?nia selecionada teve o DNA plasmidial purificado, que foi utilizado para confirma??o da sequência codificante da Bhalternina e na transforma??o da bactéria Escherichia coli cepa BL21 codon plus (DE3) RIPL por eletropora??o. Algumas col?nias foram selecionadas e submetidas ao experimento de express?o da Bhalternina por indu??o com IPTG e a análise de sua express?o foi avaliada por eletroforese. Os resultados mostraram que uma proteína de massa molecular de 56,4 kDa, valor estimado da massa molecular da Bhalternina fundida à glutationa S-transferase, foi expressa pelos clones.