原代T細胞，使用CRISPR基因敲入優(yōu)化試劑盒，敲入GFP或eGFP序列，TRAC位點敲入效率高達54%
原代T細胞，使用CRISPR基因敲入優(yōu)化試劑盒，敲入GFP或eGFP序列，RAB11a位點敲入效率高達57%%
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* 歡迎咨詢基因敲入增強劑（Enhancer），您可以聯(lián)系技術(shù)支持了解詳情或訂購，郵箱： [email protected] ，電話：400-025-8686轉(zhuǎn)5812或5815。
| 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格（元） |
|---|---|---|---|
| KIOK1 | SafeEdit TRAC sgRNA | 3 nmol | 680 |
| KIOK2 | SafeEdit Rab11a sgRNA | 3 nmol | 680 |
| KIOK3 | Ultra eSpCas9 | 200 μg | 2600 |
| KIOK4 | Ultra WTSpCas9 | 200 μg | 2150 |
| KIOK5 | ssDNA_TRAC_EGFP | 50 μg | 6800 |
| KIOK6 | ssDNA_TRAC_EGFP_CTS | 50 μg | 6800 |
| KIOK7 | dsDNA_TRAC_EGFP | 50 μg | 3300 |
| KIOK8 | dsDNA_TRAC_EGFP_CTS | 50 μg | 3300 |
| KIOK9 | ssDNA_RAB11A_GFP | 50 μg | 6200 |
| KIOK10 | ssDNA_RAB11A_GFP_CTS | 50 μg | 6200 |
| KIOK11 | dsDNA_RAB11A_GFP | 50 μg | 3000 |
| KIOK12 | dsDNA_RAB11A_GFP_CTS | 50 μg | 3000 |
| KIOK13 | TRAC CTS Annealing Oligo | 2 nmol | 60 |
| KIOK14 | RAB11A CTS Annealing Oligo | 2 nmol | 60 |
| KIOK15-1 | 基因敲入增強劑（Enhancer） | 30 μL | 760 |
| KIOK15-2 | 基因敲入增強劑（Enhancer） | 150 μL | 2350 |
備注：
如您選購KIOK6 ssDNA_TRAC_EGFP_CTS，則需要同時選購KIOK13 TRAC CTS Annealing Oligo來配合進行實驗。
如您選購KIOK10 ssDNA_RAB11A_GFP_CTS，則需要同時選購KIOK14 RAB11A CTS Annealing Oligo來配合進行實驗。
1. 請選擇您需要的目的基因敲入位點:
2. 請選擇您需要的基因敲入模板：
3. 請選擇您需要的基因敲入模板：
4. 您是否需要在您的基因敲入模板上增加CTS序列去提升敲入效率？
(CTS設(shè)計提升編輯效率的方案詳見文獻報告和案例分享
，實驗操作詳見操作指南)
請查收您的定制化試劑盒，按照《金斯瑞的實驗操作指南》的推薦試劑劑量，可以用于約12個反應(yīng)的實驗（Lonza 4D電轉(zhuǎn)平臺），或用于25個反應(yīng)的實驗（Neon電轉(zhuǎn)平臺），您可以根據(jù)您的實驗體系和試劑用量增減產(chǎn)品數(shù)量，確保每個組分的交付量足夠支持您開展實驗。
| 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 數(shù)量 |
|---|---|---|
|
KIOK1-1.5
|
SafeEdit TRAC sgRNA - 1.5 nmol | |
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KIOK1-3
|
SafeEdit TRAC sgRNA - 3 nmol | |
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KIOK1-6
|
SafeEdit TRAC sgRNA - 6 nmol | |
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KIOK2-1.5
|
SafeEdit RAB11A sgRNA - 1.5 nmol | |
|
KIOK2-3
|
SafeEdit RAB11A sgRNA - 3 nmol | |
|
KIOK2-6
|
SafeEdit RAB11A sgRNA - 6 nmol | |
|
KIOK3-100
|
Ultra eSpCas9 - 100 μg | |
|
KIOK3-200
|
Ultra eSpCas9 - 200 μg | |
|
KIOK3-400
|
Ultra eSpCas9 - 400 μg | |
|
KIOK4-100
|
Ultra WTSpCas9 - 100 μg | |
|
KIOK4-200
|
Ultra WTSpCas9 - 200 μg | |
|
KIOK4-400
|
Ultra WTSpCas9 - 400 μg | |
|
KIOK5
|
ssDNA_TRAC_EGFP - 50 μg | |
|
KIOK6
|
ssDNA_TRAC_EGFP_CTS - 50 μg | |
|
KIOK7
|
dsDNA_TRAC_EGFP - 50 μg | |
|
KIOK8
|
dsDNA_TRAC_EGFP_CTS - 50 μg | |
|
KIOK9
|
ssDNA_RAB11A_GFP - 50 μg | |
|
KIOK10
|
ssDNA_RAB11A_GFP_CTS - 50 μg | |
|
KIOK11
|
dsDNA_RAB11A_GFP - 50 μg | |
|
KIOK12
|
dsDNA_RAB11A_GFP_CTS - 50 μg | |
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KIOK13
|
TRAC CTS Annealing Oligo - 2 nmol | |
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KIOK14
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RAB11A CTS Annealing Oligo - 2 nmol |
備注：ssDNA選擇含CTS模板必須配套使用對應(yīng)位點的退火引物，dsDNA本身即為雙鏈無需退火
您可以根據(jù)實際需求選擇加購以下產(chǎn)品：
| 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 數(shù)量 |
|---|---|---|
|
KIOK3-100
|
Ultra eSpCas9 - 100 μg | |
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KIOK3-200
|
Ultra eSpCas9 - 200 μg | |
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KIOK3-400
|
Ultra eSpCas9 - 400 μg | |
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KIOK4-100
|
Ultra WTSpCas9 - 100 μg | |
|
KIOK4-200
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Ultra WTSpCas9 - 200 μg | |
|
KIOK4-400
|
Ultra WTSpCas9 - 400 μg |
參考文獻
原代T細胞，使用CRISPR基因敲入優(yōu)化試劑盒，敲入GFP或eGFP序列，TRAC位點敲入效率高達54%
原代T細胞，使用CRISPR基因敲入優(yōu)化試劑盒，敲入GFP或eGFP序列，RAB11a位點敲入效率高達57%%
在不同細胞敲入GFP序列的實驗中添加增強劑（Enhancer）后，iPSC細胞敲入效率提升至高達2倍，T細胞敲入效率提升至高達2.4倍
應(yīng)用
細胞治療、KI細胞系/動物模型構(gòu)建
優(yōu)勢
規(guī)格
應(yīng)用
長基因敲入、工藝放大/規(guī)模量產(chǎn)
優(yōu)勢
規(guī)格
應(yīng)用
替代傳統(tǒng)質(zhì)粒HDR模板，匹配申報合規(guī)性
特點
規(guī)格
UCSF Marson Lab 開發(fā)了一種含CTS設(shè)計的敲入模板，在兩端添加了Cas9蛋白靶向序列（CTS），兩端序列中互補的序列通過退火形成了雙鏈DNA。整個HDR模板中，待插入基因左右兩側(cè)為同源臂序列，同源臂序列外端為CTS序列，CTS包含PAM序列、gRNA序列和一段邊緣核苷酸序列。
通過這種設(shè)計，CTS可以讓RNP（Cas9+sgRNA）與敲入模板整合在一起進行電轉(zhuǎn)，促進其進入宿主細胞的細胞核，這種設(shè)計可以讓基因敲入模板更接近RNP的切割位點，從而提升目標基因插入效率。通過添加CTS設(shè)計，GMP適用規(guī)模的GenExact? ssDNA 在未添加增強劑的條件下，敲入效率可高達46.2%（圖3）。
