網絡研討會 ? 利用蛋白工程策略改進CRISPR-Cas技術 - 金斯瑞
CRISPR-Cas是存在于原核生物的一種后天免疫系統，用以抵擋外源遺傳物質的入侵。來自麻省總醫院和哈佛醫學院的Ben Kleinstiver的實驗室專注于開發和改進的基因編輯技術，金斯瑞邀請 了Kleinstiver博士參加基因與細胞工程線上峰會。在他的演講中，kleinstver博士分享了他的團隊應用蛋白工程策略來提高CRISPR/Cas9核酸酶的靶向活性、靶標范圍和特異性/安全性。此外，為了加快對Cas9核酸酶庫的篩選， Kleinstiver博士的團隊開發了一種高通量PAM檢測試劑盒，用于篩選Cas9 PAM特異性(HT-PAMDA)。利用此方法使kleinstver團隊能夠識別各種形式的Cas9，包括SpG (NGN)和SpRY (NAN)，其放寬PAM要求。最后，Kleinstiver博士分享了他的實驗室如何利用這些新的酶，甚至在體外作為分子工具，為克隆方法提供了更大的靈活性。
