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金斯瑞Ni-IDA親和層析介質是把IDA(亞氨基二乙酸)共價偶聯到4%交聯的瓊脂糖介質上,再通過IDA的3個結合位點螯合Ni2+制備而成,可以純化通過包括細菌、酵母、昆蟲細胞和哺乳動物細胞等蛋白表達系統表達的、含有6xHis標簽的重組蛋白。該純化介質用來純化天然條件下的His標簽蛋白,結合在介質上的蛋白用咪唑緩沖液洗脫下來。金斯瑞Ni-IDA親和層析介質的Ni2+脫落程度很低,并具有高吸附量及高穩定性,在多聚His標簽的重組蛋白的純化實驗中有非常好的表現力,具體特性見表1。

表1. Ni-IDA親層析介質的特性

柱體積
10ml
動態吸附量
20mg 6×His標簽蛋白(27kD)/ml介質
球形基質
4%交聯度瓊脂糖
平均粒徑
90μm(45-165μm)
儲存溶劑
1×PBS(含20%乙醇)
儲存&穩定性
2-8℃儲存18個月

應用實例

下圖為金斯瑞和X公司Ni-IDA親和層析介質的比較

圖1. 分別使用金斯瑞和X公司的Ni-IDA親和層析介質純化含His標簽的30kD可溶性重組蛋白樣品,該蛋白樣品來自于E.coli細胞裂解液。

  • 泳道1:上樣流出液(X公司)
  • 泳道2:洗滌流出液(X公司)
  • 泳道3:洗脫流出液(X公司)
  • 泳道4:殘留物(X公司)
  • 泳道5:上樣流出液(金斯瑞)
  • 泳道6:洗滌流出液(金斯瑞)
  • 泳道7:洗脫流出液(金斯瑞)
  • 泳道8:殘留物(金斯瑞)

產品列表

產品編號 名稱 數量 價格 操作
L00223I
Ni-IDA resin
¥1240.00
 

裝柱流程參考示意圖

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