服務優勢

最終交付

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交付識別所有“獨立抗體對”的表位鑒定報告

可添加到定制單克隆抗體開發服務當中

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可針對蛋白質抗原生成的抗體進行檢驗

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可同時對多達5個mAb進行檢驗

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可在5個mAb的不同組之間檢驗

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• 為什么要做表位鑒定？

  在抗體發現中，根據表位的對單抗進行分類：

  • 每個表位對應不同的作用機制，確保了相同組內的單克隆抗體具備相同的功能。因此，在鑒定出一個抗原上的不同表位以后，可以同時激活多種作用機制，從而提高最終效果。
  • 通過剔除針對無功能克隆的相同表位的單抗，研究人員就可以輕松減少先導化合物潛在候選品的數量。
  • 重要的是要確定哪種表位的作用最強，而不是按照通常的偏見選擇親和力最高或最常見表位的單抗。此項分析需要比較不同組內單克隆抗體的效力，從而確保選擇功能最強的單抗表位對進行進一步分析。
• 純化抗體（直接ELISA測定）
  • 使用蛋白質抗原對ELISA孔板進行包被。
  • 在開展生物素標記檢驗之前，將競爭性抗體添加到孔板內并完成結合
  • 未結合抗體將被洗脫清除，此時孔板上僅剩下已結合的抗體。
  • 將HRP標記的鏈霉親和素添加到孔板內，以便通過分光光度法觀察結合的檢驗抗體量。

  
• 上清液（間接ELISA方案）
  • 在ELISA孔板上包被指定的蛋白質抗原。
  • 使用生物素結合的二抗對檢驗抗體進行預培養。
  • 將競爭抗體加入板中，使其先于檢驗抗體（使用標記二抗）結合。
  • 所有未結合抗體將被洗去。
  • 將HRP標記的鏈霉親和素添加到孔板內，以便通過Octet RED 96的分光光度法觀察結合的檢驗抗體量。

  
• 表位鑒定報告示例

  金斯瑞對客戶自選的純化單克隆抗體開展表位鑒定后，您將收到一份表位鑒定報告，其中解釋了哪些純化單抗歸入哪個表位組內。報告示例如下所示。所有生物素標記單抗都將顯示在表頭處，而競爭性單抗將在表格左側標示。對每種檢驗抗體與競爭性抗體之間的競爭情況做出評價的直接ELISA測定的結果顯示在表格的對應單元格內。此項鑒定僅測量結合生物素標記的檢驗抗體，較低的結合百分比數值表明，當存在競爭性單克隆抗體時，檢驗的單克隆抗體無法結合，說明兩者都結合到相同的抗原上，因此在同一組內。

  結合百分比	單克隆抗體I-生物素	單克隆抗體II-生物素	單克隆抗體III-生物素	單克隆抗體IV-生物素
  無競爭性抗體	100	100	100	100
  單克隆抗體I競爭	10.3	8.8	18.6	142.7
  單克隆抗體II競爭	7.6	7.7	8.6	134.8
  單克隆抗體III競爭	10.1	9.2	11.2	132
  單克隆抗體IV競爭	93.2	106.2	108	19.8

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